【精华版】为什么做PSF测试？多久进行一次？具体怎么操作

Argolight荧光显微镜标准测试片上的渐进线对

没错，Argolight标准测试片上的渐进线对就是用来测试显微镜分辨率的标准图样。有了它，分辨率的事儿似乎变得更容易判断了：仅凭肉眼都能看出来，哪一对儿线对看上去有间距，哪一对儿线对看上去妥妥的挤在了一起。这一过程甚至都不需要配套的Daybook定量分析软件的协助了。可是，确实有很多用户难以割舍点扩散函数（PSF）测试。一方面，PSF测试能够提供的不仅仅是分辨率的数值，另一方面，习惯成自然，PSF测试早已成为一项常规项目。于是，Argolight干脆接地气地将PSF测试功能加入了Daybook软件！新功能推出之际， Argolight寻找了几家重要生物成像中心的显微镜专家并就PSF测试这一话题，采访了他们的应用心得。您会发现他们进行这项测试的目的、频率其实不尽相同。或许，他们的想法也会给您一些启发吧。

 

Damien Schapman

法国鲁昂大学 诺曼底细胞成像平台（PRIMACEN）的工程师和显微镜专家

“我应用PSF测试来进行两项工作：

• 判断物镜的质量，并将它当下的情况与之前使用情况进行比对
• 作为第二个，甚至第三个视角来评估激光光源所处的光路的情况

我从来都不仅仅只做PSF测试。它一直是作为另一项测试或诊断方案的补充。

通过半峰全宽得出的分辨率结果很重要，但我不仅仅仰仗它来评估显微镜/物镜的状态。

我承认，当系统表现正常，其他的诊断方案没有引起我担忧的时候，我就不会花时间去做PSF测试。这主要是因为这项测试很耗费时间。”

Dr. Steffen Dietzel

德国慕尼黑大学 生物医学中心 生物成像核心设施的负责人

“我记录PSF是为了

• 测量分辨率
• 检查显微镜在长时间内的性能

理想状态下，我们希望能定期地每周或者每两周，对每一台系统的每一个物镜都进行一次PSF测试和其他测试。这就像是对电脑进行数据备份需要达到一定的频率，其实真正的问题在于：如果显微系统发生了一个问题，失去几周的工作数据，对你来说是可接受的呢？

比这些PSF测试结果的数值本身对我们更为重要的，是长时间内这些值的稳定性。

PSF测试无法反映所有存在的问题，但它已经可以反映不少问题了。”

 

Dr. Aurélien Dauphin

法国巴黎细胞和组织成像机构的生物学家、显微镜学家和生物图像分析员

“我多数的测试都是针对高倍率的物镜（40X及以上），每4-6个月进行一次。

我进行这项测试是为了三个目的：

• 了解实际的分辨率
• 了解球差和物镜的瑕疵
• 获得一个PSF结果以便用于反卷积算法

一段时间之后，镜油可能进入物镜内部，造成一些成像问题。这时PSF测试就很有用。

相比于其他的一些质量控制测试，我们进行PSF测试的频率是比较低的，因为我们的经验是，PSF测试结果的起伏比照明均匀度或者激光功率的起伏小。”

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